通过陆运输的标本由专业车辆进交运迎

血清抗体检测用做新冠病毒核酸检测的弥补检测,也用于评估疫苗接种后诱发的免疫反映。应采用中国药品监视办理局核准的试剂进行检测,采集急性期(发病7天内)和恢复期(3-4周后)双份血清进行检测,也可按照临床需要确定采集时间,疑似新冠病毒传染者抗体检测阳性时应解除新冠疫苗接种要素的影响。

新冠病毒标本采集和检测手艺指南为指点各级医疗卫朝气构和其他相关机构规范开展新冠肺炎标本采集取尝试室检测工做,确保检测质量,提高检测效率,特制定本指南。

不具备开展核酸检测前提的下层医疗卫朝气构、隔离察看人员和有抗原检测需求的社区居平易近能够进行抗原检测。抗原检测确诊病例或无症状传染者诊断的根据,仅用做核酸检测方式的弥补,实现“快筛快检”,提高传染者发觉的及时性。具体实施流程及要求参照《新冠病毒抗原检测使用方案(试行)》(联防联控机制综发﹝2022﹞21号)施行。

连系流调消息和病例链关系,优先选择以下标本开展测序:核酸检测Ct值≤32 的本土疫情中的首发或晚期病例、取晚期病例有风行病学联系关系的环节病例、传染来历不明的本土病例、境外输入病例、入境物品及相关阳性标本、疫苗接种后核酸检测阳性者标本等。测序成果应取当地近一个月的输入病例和本土病例序列进行比对。对统一链或风行病学关系明白的病例无需全数测序。

新冠病毒毒株或其它潜正在传染性生物材料分类属于A类,对应的结合国编号为UN2814,包拆合适国际平易近航组织文件Doc9284《物品平安航空运输手艺细则》的PI620分类包拆要求;标本属于B类,对应的结合国编号为UN3373,包拆合适国际平易近航组织文件Doc9284《物品平安航空运输手艺细则》的PI650分类包拆要求;通过其他交通东西运输的可参照以上尺度包拆。新冠病毒毒株或其它潜正在传染性材料运输应按照《可传染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或标本运输办理》(原卫生部令第45 号)打点《准运证书》。

用于分拆、储存试剂、制备扩增反映夹杂液,以及储存和预备尝试耗材。该区应配备冰箱或冰柜、离心计心情、试验台、涡旋振荡器、微量加样器等。为防止污染,该区宜连结正压形态。

通过航空进交运送的标本抵达目标地机场后,由专业运输车辆运送至领受单元,通过陆运输的标本由专业车辆进交运送,运送人员和领受人员应对标本进行双签收。新冠病毒标本及毒株应由专人办理,精确记实标本及毒株的来历、品种、数量,编号登记,采纳无效办法确保毒株和标本的平安,发生误用、恶意利用、被盗、被抢、丢失、泄露等事务。

包罗进口冷链食物或进口货色的表里包拆概况,以及运输储藏东西等可能被污染的部位进行涂抹采集的标本。

正在国际间运输的新冠病毒标本或毒株,该当规范包拆,按照《收支境特殊物品卫生检疫办理》打点相关手续,并满脚相关国度和国际相关要求。

对核酸检测Ct值≤30的所有境外输入病例的标本、本土疫情中的首发或晚期病例、取晚期病例有风行病学联系关系的环节病例、传染来历不明的本土病例以及疫苗接种后核酸阳性者标本开展病毒分手培育。

3.按照临床及尝试室检测工做的需要,可正在住院、隔离期间多次采样,可同时采集呼吸道、血液、便等多种标本。采样人员应严酷遵照采样规范,保障所采集标素质量合适要求,同时应细致记实受检者消息,可操纵条形码扫描等消息化手段采集相关消息。

2.确诊病例、无症状传染者、入境人员、亲近接触者和密接的密接正在住院、隔离察看或健康监测期间应“单采单检”,即零丁采集个别的标本,单管进行核酸检测,不得进行混采混检。

处置标本采集的手艺人员该当颠末生物平安和尝试室检测手艺培训,熟练控制标本采集方式和操做流程,查核及格后方可上岗。采样时,应做好标本消息记实,严酷恪守操做流程,确保标素质量合适要求、标本及相关消息可逃溯。

。次要修订内容如下:优化调整风险人员的隔离办理刻日和体例,同一封管控区和中高风险区规定尺度,完美疫情监测要求,优化区域核酸检测策略。

采样人员一手轻扶被采集人员的头部,一手执拭子,拭子贴鼻孔进入,沿下鼻道的底部向后慢慢深切,因为鼻道呈弧形,不成用力过猛,免得发生外伤出血。待拭子顶端达到鼻咽腔后壁时,悄悄扭转一周(如遇反射性咳嗽,应逗留顷刻),然后慢慢取出拭子,将拭子头浸入含2~3ml病毒保留液(也可利用等渗盐溶液、组织培育液或磷酸盐缓冲液)的管中,尾部弃去,旋紧管盖。

将扩增系统放入荧光定量PCR仪,按照试剂盒仿单设置扩增法式,启动扩增法式。扩增完成后反映管不成开盖,间接放于垃圾袋中,封好袋口,不成高压,按一般医疗废料转移出尝试室处置。检测机构所选用的新冠病毒核酸检测试剂应针对新冠病毒基因组中读码框1ab(open reading frame 1ab,ORF1ab)和核衣壳卵白(nucleocapsid protein,N)基因,人体标本检测准绳上选择含内源性内参的核酸检测试剂。

各省级卫生健康行政部分要按照疫情防控需要和尝试室生物平安相关要求,及时研判提出新冠病毒尝试室检测生物标本措置看法。对确需保留的,该当尽快指定具备保留前提的机构按对集华夏则进行保留,或送至国度级菌(毒)种保藏核心保藏;对无需保留的,由相关机构按照生物平安相关要求及时处置。

局部麻醉后将纤维支气管镜通过口或鼻颠末咽部插入左肺中叶或左肺舌段的支气管,将其顶端契入支气管分支启齿,经气管活检孔慢慢插手灭菌心理盐水,每次30~50ml,总量100~250ml,不该跨越300ml。

将灭活后的标本取出,正在生物平安柜内打开标本采集管加样,或按照核酸提取试剂盒的申明,将标本取裂解液感化脚够时间后继续核酸提取步调,核酸提取完成后当即封盖。取适量核酸加至PCR扩增反映系统中。

机能验证。临床标本检测前,尝试室应对核酸提取试剂、提取仪、扩增试剂、扩增仪等构成的检测系统进行需要的机能验证,机能目标包罗但不限于细密度(至多要有反复性)和最低检测限。

物品和标本的采集检测,还需正在采样前及采样过程中至多设一个现场空白标本及一个运输空白标本,以进行过程中的质量节制。

标本采集后该当尽快送往尝试室,标本采集后室温(25℃)放置不宜跨越4小时。若是需要长途运输,应采用干冰保藏,难以获取干冰时,可利用冰袋、冰排等低温

尝试室确认阳性病例需满脚以下两个前提中的一个:前提一:统一份标本中新冠病毒2个靶标(ORF1ab、N)及时荧光RT-PCR检测成果均为阳性。若是呈现单个靶标阳性的检测成果,则需要从头检测或从头采样复核。前提二:两种标本及时荧光RT-PCR同时呈现单靶标阳性,或同品种型标本两次采样检测中均呈现单个靶标阳性的检测成果,可鉴定为阳性。取生物材料核酸检测阳性要解除疫苗接种物残留污染的影响。核酸检测成果假阳性的可能缘由包罗:标素质量差;标本采集时间过早或过晚;标本保留、运输和处置不妥;其他缘由如病毒变异、PCR等。

按照新冠病毒特征、致病性和临床材料等消息,该病毒按照第二类病原微生物进行办理,具体要求如下:

区域可恰当归并。新冠核酸检测尝试室按功能区安插的分歧,各区的功能如下:1.所有标本该当放正在大小适合的带螺旋盖内有垫圈、耐冷冻的标本采集管里,容器外说明标本编号、品种、姓名及采样日期。可分为集中安插形式和分置形式。因地制宜,拧紧。压力梯度),开展新冠病毒核酸检测的尝试室该当设置以下区域:试剂储存和预备区、标本制备区、扩增和产品阐发区。便利工做”的准绳。按照利用仪器的功能,如采用标本加样、核酸提取及扩增检测为一体的从动化阐发仪,标本制备区、扩增和产品阐发区可归并。集中安插形式的尝试室设置应遵照“各区,单向流动(留意风向,

按照海运港口大型进口冷冻物品加工处置场合排水系统分布环境,沉点拔取污水排水口、内部管网汇集处、污水井、污水流向的下逛或取市政管网的毗连处等环节对未经消杀处置的污水进行采样。

2.将密闭后的标本拆入密封袋,每袋限一份标本。标本包拆要求要合适《品航空平安运输手艺细则》响应的尺度。

尝试室该当制定尺度操做法式(SOP),并严酷按照SOP进行操做。接到标本后,该当正在生物平安柜内对标本进行清点查对,并根据SOP进行试剂预备、标本前处置、核酸提取、核酸扩增、成果阐发及演讲。尝试室该当成立可疑标本复检的流程。

各省(自治区、曲辖市)发觉的本土疫情中的首发或晚期病例、取晚期病例有风行病学联系关系的环节病例、传染来历不明的本土病例、境外输入病例、入境物品及相关阳性标本等所有原始标本应平行采集至多2份,一份送各省级疾控机构进行检测,另一份送中国疾控核心病毒病所进行检测、复核,同时附标本送检单(见附件12-1)。各省分手到的新的代表性毒株,应及时送中国疾控核心病毒病所复核、保藏。

4.人群筛查应按照核酸提取、检测所用试剂的要求确定采样管,用于病毒分手的标本应放置于不含有病毒灭活剂的采样管。

将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管(约30cm 深处),注入5ml心理盐水,接通负压,扭转收集器头部并迟缓退出,收集抽取的粘液,并用采样液冲刷收集器一次,也可用小儿导尿管接正在50ml打针器上来替代收集。

尝试室检测人员该当具有尝试室工做履历以及相关专业手艺技术,接管过新冠病毒相关查验检测技术培训。检测机构该当按照所开展检测项目及标本量配备尝试室检测人员,以及时、高效完成检测和成果演讲。

新冠病毒培育、动物传染尝试该当正在生物平安及以上尝试室开展;未经培育的传染性材料的操做该当正在生物平安二级及以上尝试室进行,同时采用不低于生物平安尝试室的小我防护;灭活材料的操做该当正在生物平安二级及以上尝试室进行;不涉及传染性材料的操做,能够正在生物平安一级尝试室进行。

利用含胍盐等灭活型采样液的标本无需进行灭活处置,可间接进行核酸提取,而利用非灭活型采样液的标本,按照核酸提取试剂盒的申明,取适量标本加至核酸提取裂解液中充实混匀感化必然的时间则能够无效灭活病毒。选用热灭活时可采用95℃加热15分钟,不保举采用56℃孵育30分钟的处置体例灭活病毒,该前提不克不及保障充实灭活病毒。污水水样标本处置可参考《污水中新型冠状病毒富集浓缩和核酸检测方式尺度》(WS/T 799-2022)保举的方式;污水拭子标本处置可参考《农贸(集贸)市场新型冠状病毒监测手艺规范》(WS/T776-2021)保举的方式。

被采集人员头部微仰,嘴张大,显露两侧扁桃体,采样人员将拭子越过舌根,正在被采集者两侧扁桃体稍微用力来回擦拭至多3次,然后再正在咽后壁上下擦拭至多3次,将拭子头浸入含2~3ml病毒保留液(也可利用等渗盐溶液、组织培育液或磷酸盐缓冲液)的管中,尾部弃去,旋紧管盖。口咽拭子也可取鼻咽拭子放置于统一管中。

由上级疾控部分对下级疾控尝试室进行核酸检测质控查核,中国疾控核心每年至多开展一次对省级疾控机构尝试室的质控查核,并同时供给全国新冠病毒尝试室检测质控方案,省级针对地市级尝试室的质控查核每年不少于两次。各检测机构该当加强核酸检测质量节制,选用扩增检测试剂盒指定的核酸提取试剂和扩增仪。

利用含有EDTA抗凝剂的线ml,按照所选用核酸提取试剂的类型确定以全血或血浆进行核酸提取。如需分手血浆,将全血1500~2000rpm离心10分钟,收集上清液于无菌螺口塑料管中。

各省份要成立本省输入、本土病例新冠病毒基因组数据库,及时进行序列比对阐发,逐渐提高自从阐发能力。获得的全数测序数据都必需中国疾控核心病毒病所用于我国新冠病毒溯源数据库的更新取。对本土疫情的或首发病例、本土疫情中由分歧基因型的毒株导致的新链的或首发病例,测序完成后应于24小时内将数据报送病毒病所,病毒病所确认数据完整无误后于48小时之内反馈成果;对本土疫情中归属已知链的病例、境外输入病例、标本(非或首发病例相关),测序数据于每周周一上午集中,病毒病所确认数据完整无误后于一周之内反馈成果。

尽量采集急性期、恢复期双份血清。血清该当尽早(最好正在发病后7天内)采集,第二份血清该当正在发病后第3~4周采集。采集量5ml,利用无抗凝剂的实空采血管。血清标本次要用于抗体的测定,不进行核酸检测。

5.物品和监测应按照监测目标和防控需求,确定采样物品、取数量,采样时应严酷遵照采样规范。

具有新冠病毒分手、培育天分的省级疾控机构应开展病毒分手培育工做,收到环节标本后96小时内开展相关工做,正在获得分手毒株后96小时内将毒株送病毒病所保留存案,并将毒株序列等相关消息报送病毒病所。不具备病毒分手前提的省份,要正在病例演讲后48小时内启动送样流程,将标本送达病毒病所,病毒病所收到标本后应正在96小时内启动病毒分手工做,获得毒株后96小时内反馈阐发成果。

该当选择国度药品监视办理部分核准的试剂,按照核酸提取试剂及扩增系统的要求选择配套的标本采样管,不免提取核酸间接进行核酸扩增反映。

《关于印发新型冠状病毒肺炎防控方案(第九版)的通知》含14个附件,我们将查验科沉点关心内容“新冠病毒标本采集和检测手艺指南”零丁拾掇如下,以供参考。

取1ml标本处置液,挑取黄豆粒大小的粪便标本加至管中,悄悄吹吸3~5次,室温静置10分钟,以8000rpm离心5分钟,吸收上清液进行检测。粪便标本处置液可自行配制,配方见表 2。也可利用HANK’S液或其它等渗盐溶液、组织培育液或磷酸盐缓冲液消融便标本制备便悬液。如患者呈现腹泻症状,则留取粪便标本3~5ml,悄悄吹打混匀后,以8000rpm离心5分钟,吸收上清液备用。

用于病毒分手和核酸检测的标本该当尽快进行检测,可正在24小时内检测的标本置于4℃(2℃~8℃)保留;24小时内无法检测的标本应置于-70℃或以下保留(如无-70℃保留前提,则于-20℃冰箱暂存)。血清标本可正在4℃存放3天,-20℃以下可持久保留。境外高风险区域人群以及新冠肺炎患者的亲近接触者等人员的核酸检测标本,检测后,该当正在-20℃保留7天。其他一般人群筛查标本,则可正在4℃保留24小时。该当设立专库或专柜零丁保留标本。

室间质评。尝试室应常态化加入国度级或省级疾控机构组织的室间质评。对检丈量大以及承担沉点人群筛查等使命的尝试室,可恰当添加室间质评频次。不按要求加入室间质评的,或室间质评成果不及格的,应传递并国度卫健委,待室间质评通事后方可开展核酸检测。

标本转运桶的、标本灭活(需要时)、核酸提取及模板插手至扩增反映管等。该区应配备冰箱或冰柜、生物平安柜、离心计心情、试验台、微量加样器,可按照现实工做需要选配从动化核酸提取仪等。标本转运桶的、分拆应正在生物平安柜内完成。为防止污染,该区宜连结负压形态。为操做便利,标本的分拆以及核酸提取也能够正在的生物平安二级(BSL-2)尝试室进行,提取的核酸能够转运至该区加至扩增反映液中。

用取负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道排泄物。将收集器头部插入鼻腔或气管,接通负压,扭转收集器头部并迟缓退出,收集抽取的粘液,并用3ml采样液冲刷收集器一次(亦可用小儿导尿管接正在50ml打针器上来替代收集器)。

用实空负压采血管采集血液标本5ml,室温静置30分钟,1500~2000rpm离心10分钟,收集血清于无菌螺口塑料管中。

每个病例必需采集呼吸道标本(上呼吸道标本或下呼吸道标本),沉症病例优先采集下呼吸道标本;按照临床需要可留取便标本、全血标本、血清标本和尿标本。物品和标本按照监测需求采集。标本品种如下:

以省、自治区、曲辖市为单元确定开展新冠病毒全基因组测序的机构,包罗省级疾控机构和科研机构;具备测序前提的省份要正在领受标本后24小时内开展测序工做。不具备测序前提的省份要及时将标本送至病毒病所,病毒病所收到标本后及时启动序列测定工做。

1.住院病例的标本由所正在病院的医护人员采集,亲近接触者标本由本地指定的疾控机构、医疗机构担任采集。采集标本时,要按照分歧采集对象设置分歧的采样区域,发烧患者前去发抢手诊就诊和采样。

要求病人深咳后,将咳出的痰液收集于含3ml采样液的采样管中。若是痰液未收集于采样液中,可正在检测前插手2~3ml采样液,或插手痰液等体积的痰液消化液。痰液消化液储存液配方见表1。利用时将储存液用去离子水稀释至50ml,取痰液等体积夹杂利用,或者参照试剂申明进行利用,也可采用痰液等体积的含1g/L卵白酶K的磷酸盐缓冲液将痰液化。

病毒全基因组测序能够监测病毒基因组突变,为新冠病毒核酸检测试剂、疫苗研发策略的改变供给尝试数据,同时也为流调溯源工做供给支撑。

进行核酸扩增反映和产品阐发。该区应配备及时荧光定量PCR仪。为防止扩减产物污染,该区宜连结负压形态,压力等于或低于标本制备区。

室内质控。尝试室可按照《国度卫生健康委办公厅关于医疗机构开展新型冠状病毒核酸检测相关要求的通知》(国卫办医函〔2020〕53号)要求规范开展室内质控。每批检测至多有1份弱阳性质控品(第三方质控品,凡是为检出限的1.5-3倍)、3份阳性质控品(心理盐水)。质控品随机放正在临床标本中,参取从提取到扩增的全过程。大规模人群筛查时,一旦呈现阳性成果,应对阳性标本采用别的一到两种更为活络的核酸检测试剂对原始标本进行复核检测,复核阳性方可报出。

用消毒棉拭子悄悄插入3~5cm,再悄悄扭转拔出,当即放入含有3~5ml病毒保留液的15ml外螺旋盖采样管中,弃去尾部,旋紧管盖。

采集污水的水体标本时,参考《污水中新型冠状病毒富集浓缩和核酸检测方式尺度》(WS/T 799-2022),用无菌聚乙烯瓶采集污水样本,采样体积为300ml。可按照现场前提和检测需求确定水样采集体例,如瞬时水样(采样点位某一时间随机采集的样本)或夹杂水样(统一采样点位分歧时间所采集的瞬时水样夹杂后的样本);如农贸(集贸)市场内排水沟内无法采集脚够体积水样,可采集污水的拭子标本,参考《农贸(集贸)市场新型冠状病毒监测手艺规范》(WS/T776-2021)保举的方式,用拭子浸入吸附污水,将拭子放回采样管浸湿,取出后再次浸入污水,反复3次以上,对每个污水采样应进行多点分布式采样。

参考《农贸(集贸)市场新型冠状病毒监测手艺规范》(WS/T776—2021)保举的方式,采样拭子充实浸湿病毒保留液后正在概况反复涂抹,将拭子放回采样管浸湿,取出后再次涂抹采样,反复3次以上。对概况较大的物体进行多点分布式采样。

核酸检测尝试室质控细致内容拜见《国度卫生健康委办公厅关于加强疾控机构新冠病毒核酸检测尝试室质量节制的通知》(国卫办疾控函〔2021〕548号)《疾控机构新冠病毒核酸检测质量节制方案》。